第1题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
第2题
A.Western印迹转移技术
B.Northern印迹转移技术
C.基因的表现型分析法
D.Southern印迹转移技术
第3题
A.膜上的物质:Southern杂交是DNA,Northern杂交是RNA
B.杂交条件不一致
C.探针不一致
D.电泳条件不同,Northern杂交为变性条件,gouthern杂交为非变性条件
第6题
A.①
B.①和③
C.②和④
D.①②和③
第7题
A.①②和③
B.①和③
C.②和④
D.①
第8题
Southern印迹法的步骤不包括以下哪项
A.DNA与载体的连接
B.用限制酶消化DNA
C.用凝胶电泳分离DNA片段
D.DNA片段转移至硝酸纤维素膜上
E.用一个标记的探针与膜杂交
第9题
A.DNA复制和转录的场所主要在细胞核中
B.DNA—RNA杂交区段最多存在5种核苷酸
C.正常基因转录时就需要形成DNA—RNA杂交区段
D.mRNA难以从DNA上分离可能跟碱基的种类和比例有关
第10题
一种相对较常见的隐性遗传病——口臭综合征(FM)是完全外显的,病因是Fm基因上的多种突变。基因组DNA经过HpaⅠ酶切后,用来自于Fm基因的DNA作探针进行杂交,发现基因内部设有HpaⅠ位点,但基因周边HpaⅠ的位点在个体间存在差异,至少造成了3种RFLP人群,他们分别为13、10和7 kb。下图是两个小的家系中,各个成员的Southern杂交图显示于家系下面。 (1)左图中哪一个酶切片段与父亲的致病突变有关? (2)右图中哪一个酶切片段与母亲的致病突变有关?
(3)如果左边家系的男孩与右边家系的女孩结婚,他们的后代患病的可能性有多大? (4)他们的小孩是携带者的可能性有多高?