用HindⅢ消化鼠的基因组,用某探针获得一个简单的RFLP,包含1.7 kb和3.8 kb两个片段。一个弯尾的杂合
第1题
在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个Hind Ⅲ的切点。用Hind Ⅲ切割果蝇基因组DNA,以pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ对克隆15进行了酶切分析,电泳结果如图Q18.1(用酶切的pBP1质粒DNA作对照),旁边标出了片段的大小。
图Q18.1酶切电泳图谱
1~2:Hind Ⅲ切割;3~4:EcoR Ⅴ切割;5~6:Hind Ⅲ+EcoR Ⅴ;1、3、5是质粒DNA;2、4、6是15号克隆
第2题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
第3题
Southern印迹法的步骤不包括以下哪项
A.DNA与载体的连接
B.用限制酶消化DNA
C.用凝胶电泳分离DNA片段
D.DNA片段转移至硝酸纤维素膜上
E.用一个标记的探针与膜杂交
第5题
图Q6.1 一段基因组DNA及其cDNA的限制酶切图谱限制酶的字母缩写:B,BamH Ⅰ;C,ClaⅠ;H,Hind Ⅲ;R,EcoR Ⅰ;S,Sal Ⅰ;AAA,poly(A)尾巴
第6题
检测减数分裂产物。下表给出了每种类型分别与探针A和B杂交的DNA片段:
(1)这些不同孢子DNA如何产生? (2)画出对应的染色体区域。
第7题
(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大? (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段,用HhaⅠ完全酶切,进行电泳,那么用EB染色或放射自显影,会分别得到什么样的图?
第8题
一种相对较常见的隐性遗传病——口臭综合征(FM)是完全外显的,病因是Fm基因上的多种突变。基因组DNA经过HpaⅠ酶切后,用来自于Fm基因的DNA作探针进行杂交,发现基因内部设有HpaⅠ位点,但基因周边HpaⅠ的位点在个体间存在差异,至少造成了3种RFLP人群,他们分别为13、10和7 kb。下图是两个小的家系中,各个成员的Southern杂交图显示于家系下面。 (1)左图中哪一个酶切片段与父亲的致病突变有关? (2)右图中哪一个酶切片段与母亲的致病突变有关?
(3)如果左边家系的男孩与右边家系的女孩结婚,他们的后代患病的可能性有多大? (4)他们的小孩是携带者的可能性有多高?
第9题
A.10只鼠妇太多了,用2只就可以
B.纸盒上面应该全部用玻璃板盖住
C.纸盒底部两边都应该是细湿土
D.没有错误,不需要修改